革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌在化學(xué)組成和生理性質(zhì)上有很多差別，染色反應(yīng)不一樣 ?，F(xiàn)在一般認為革蘭氏陽性菌體內(nèi)含有特殊的核蛋白質(zhì)鎂鹽與多糖的復(fù)合物，它與碘和結(jié)晶紫的復(fù)合物結(jié)合很牢，不易脫色，陰性菌復(fù)合物結(jié)合程度底 ， 吸附染料差，易脫色，這是染色反應(yīng)的主要依據(jù) 。
另外 ， 陽性菌菌體等電點較陰性菌為低，在相同PH條件下進行染色，陽性菌吸附堿性染料很多，因此不易脫去 ， 陰性菌則相反 。所以染色時的條件要嚴格控制 。例如，在強堿的條件下進行染色 ， 兩類菌吸附堿性染料都多，都可呈正反應(yīng)；PH很低時，則可都呈負反應(yīng) 。此外，兩類菌的細胞壁等對結(jié)晶紫―碘復(fù)合物的通透性也不一致，陽性菌透性小 ， 故不易被脫色，陰性菌透性大，易脫色 。所以脫色時間，脫色方法也應(yīng)嚴格控制 。
革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個步驟，具體操作方法是：
1）涂片固定 。
2）草酸銨結(jié)晶紫染1分鐘 。
3）自來水沖洗 。
4）加碘液覆蓋涂面染1分鐘 。
5）水洗，用吸水紙吸去水分 。
6）加95%酒精數(shù)滴，并輕輕搖動進行脫色，30秒后水洗，吸去水分 。
7）蕃紅梁色液（?。┤?0秒鐘后，自來水沖洗 。干燥 ， 鏡檢 。
染色的結(jié)果，革蘭氏正反應(yīng)菌體都呈紫色 ， 負反應(yīng)菌體都呈紅色 。
如果有可能，找本細胞的書看看，會有，最好是實驗用書 ， 會詳細有方法的介紹 。
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